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液相色譜儀出現(xiàn)峰展寬的情況是怎么回事?有辦法解決嗎?

更新時(shí)間:2022-05-31瀏覽:5323次

  液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
 
  液相色譜儀在條件:流動(dòng)相、固定相、溫度和壓力等一定時(shí),樣品濃度很低時(shí)Cs、Cm很小時(shí),K只取決于組分的性質(zhì),而與濃度無(wú)關(guān)。這只是理想狀態(tài)下的色譜條件,在這種條件下,得到的色譜峰為正常峰;在許多情況下,隨著濃度的增加,K減小,這時(shí)色譜峰為拖尾峰;而有時(shí)隨著溶質(zhì)濃度增加,K也增加,這時(shí)色譜峰為前延峰。因此,只有盡可能減少進(jìn)樣量,使組分在柱內(nèi)濃度降低,K恒定時(shí),才能獲得正常峰。
 
  而出現(xiàn)峰展寬的時(shí)候就要注意了,可能是以下原因:
 
  1、流動(dòng)相粘度過(guò)高
 
  2、色譜柱污染或失效,柱效太低
 
  3、進(jìn)樣體積過(guò)大
 
  4、呈現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)未被*分離的峰
 
  5、保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
 
  6、柱溫過(guò)低
 
  7、樣品超載
 
  8、保護(hù)柱污染或失效
 
  9、柱外體積過(guò)大
 
  10、緩沖液溶度太低
 
  解決方法也很簡(jiǎn)單:
 
  1、清洗或更換色譜柱
 
  2、減小進(jìn)樣體積
 
  3、等度洗脫時(shí)增加強(qiáng)溶劑濃度,或采用梯度洗脫
 
  4、選擇其他色譜柱改善分離效果
 
  5、稀釋樣品,或采用小體積進(jìn)樣
 
  6、檢查各接頭處的連接,避免死體積形成
 
  7、增加濃度
 
  8、適當(dāng)提高柱溫
 
  9、更換保護(hù)柱
 
  10、增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相

 

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